光散射法測試分子量,采用的是靜態(tài)光散射還是動態(tài)光散射?
光散射法可以通過測量溶液中大分子溶質(zhì)顆粒在激光作用下形成的散射光來獲得其分子量信息。根據(jù)測量條件和方法不同,光散射法可以分為靜態(tài)光散射和動態(tài)光散射兩種類型。
靜態(tài)光散射法(Static?。蹋椋纾瑁簟。樱悖幔簦簦澹颍椋睿?,SLS)是一種在很短時間內(nèi)測量單個顆粒的光強散射信號能力,主要用于大分子聚合物、膠體粒子解離聚集和蛋白等生化高分子領(lǐng)域的分子量測定。它依賴于溶液中顆粒的濃度、顆粒半徑和分子量,測量散射角的光強信號大小,并利用相應(yīng)的理論公式對信號進(jìn)行綜合分析,以獲得樣品分子量等相關(guān)信息。
動態(tài)光散射法(Dynamic?。蹋椋纾瑁簟。樱悖幔簦簦澹颍椋睿?,DLS)則是一種基于固有Brown運動(波爾茨曼運動)的分子量、分子半徑及聚集態(tài)的粒子大小分布測量方法。通過觀察溶液中顆粒的隨機非定常Brown運動產(chǎn)生的光學(xué)散射信號,測量顆粒的自相關(guān)函數(shù)并分析獲得顆粒尺寸信息。這種方法主要適用于小分子聚合物、膠體顆粒和生物大分子等領(lǐng)域。
因此,如果需要利用光散射法測量單個顆粒的散射光強,以測量其分子量(或者準(zhǔn)確來說是顆粒的分子量)則使用靜態(tài)光散射法;而如果需要測量該顆粒在溶液中的大小分布,則需要采用動態(tài)光散射法。